紫外凝膠成像儀是一種用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中對(duì)DNA或RNA進(jìn)行切膠、拍照、觀察和分析的實(shí)驗(yàn)室儀器。它主要由CCD相機(jī)、暗室和分析軟件等部分組成,能夠提供白光和紫外光以及藍(lán)光光源進(jìn)行拍攝,并通過(guò)內(nèi)置的圖像捕捉及分析軟件對(duì)圖像進(jìn)行處理。
下面將對(duì)紫外凝膠成像儀操作流程進(jìn)行詳細(xì)闡述: 1.開(kāi)機(jī)前準(zhǔn)備
檢查電源與數(shù)據(jù)線(xiàn)連接:確保儀器的電源線(xiàn)與數(shù)據(jù)線(xiàn)已正確連接,并確認(rèn)儀器處于關(guān)閉狀態(tài)。
開(kāi)啟電源:首先打開(kāi)儀器的電源開(kāi)關(guān),然后打開(kāi)電腦,進(jìn)入系統(tǒng)界面。
2.啟動(dòng)軟件
進(jìn)入操作界面:雙擊電腦桌面上的“QuantityOne”軟件快捷方式,進(jìn)入軟件操作界面。
3.準(zhǔn)備樣本
放置凝膠:將待觀測(cè)的凝膠小心放置在觀測(cè)臺(tái)上,避免產(chǎn)生氣泡,以免影響觀測(cè)結(jié)果。
4.選擇光源與濾光片
光源選擇:根據(jù)需要選擇透射紫外光、側(cè)面(反射)白光等光源模式。
濾光片調(diào)整:如果需要進(jìn)行核酸類(lèi)物質(zhì)的紫外光觀測(cè)分析,應(yīng)將濾光片撥至CCD鏡頭前。
5.圖像采集
對(duì)焦與調(diào)節(jié):在軟件中選擇“live/Focus”模式,通過(guò)調(diào)節(jié)光圈大小、聚焦遠(yuǎn)近及圖像大小,優(yōu)化圖像質(zhì)量。
采集圖像:根據(jù)需要選擇自動(dòng)或手動(dòng)模式獲取圖像。
6.圖像保存與分析
保存圖像:完成圖像采集后,點(diǎn)擊“SAVE”鍵保存。如果需要導(dǎo)出為其他格式,如JPEG/TIFF,可在“FILE”菜單下選擇相應(yīng)導(dǎo)出選項(xiàng)。
圖像分析:保存的圖像可直接在軟件中進(jìn)行分析,或保存后稍后分析。
此外,在了解紫外凝膠成像儀是操作流程的同時(shí),還需要注意以下幾點(diǎn):
1.在使用過(guò)程中,切勿打開(kāi)凝膠成像系統(tǒng)的前面板,以防止紫外線(xiàn)污染。
2.照相完畢后,應(yīng)及時(shí)使用較軟的紙擦拭干凈遺留在觀測(cè)板上的水或液體。
3.調(diào)焦過(guò)程中動(dòng)作要輕柔,以免影響儀器性能。
4.若圖像上出現(xiàn)高亮紅點(diǎn),說(shuō)明曝光過(guò)度,此時(shí)需要縮小光圈。
5.觀測(cè)結(jié)束后,及時(shí)關(guān)閉光源以延長(zhǎng)燈管使用壽命。
6.盡可能不要將電腦連接到互聯(lián)網(wǎng)或局域網(wǎng),并在電腦上安裝殺毒軟件,以保證數(shù)據(jù)安全。